"Εάν τα αρχικά μας αποτελέσματα μπορούν να αναπαραχθούν από άλλα εργαστήρια, θα αλλάξουν τον τρόπο που σκεφτόμαστε σήμερα για τα αίτια της νόσου του Αλτσχάιμερ", λέει ο Δρ. Ramón Trullas, καθηγητής έρευνας στο Ανώτατο Συμβούλιο Επιστημονικής Έρευνας ) στο Ινστιτούτο Βιοϊατρικής Έρευνας της Βαρκελώνης και επικεφαλής της μελέτης. Κατά την άποψή του, αυτή η ανακάλυψη θα μπορούσε να επιτρέψει την αναζήτηση πιο αποτελεσματικών θεραπειών στην προκλινική φάση.
Επί του παρόντος, ο μόνος τρόπος για ακριβή διάγνωση της νόσου είναι η μεταθανάτια νευροπαθολογική ανάλυση. Η σχέση μεταξύ γνωστών βιοδεικτών με την πάθηση είναι ασαφής, οπότε είναι σχεδόν αδύνατο να διαγνωσθούν προκλινικά στάδια με πραγματική βεβαιότητα.
Οι ερευνητές του CSIC δείχνουν στο έργο τους ότι η μείωση του περιεχομένου μιτοχονδριακού DNA (mtDNA) στο CSF μπορεί να είναι ένας προκλινικός δείκτης της νόσου του Alzheimer. και από την άλλη πλευρά, ότι μπορεί να υπάρχει άμεση αιτιώδης σχέση. Η υπόθεση είναι ότι η μείωση στα επίπεδα μιτοχονδριακού DNA στο CSF αντικατοπτρίζει τη μείωση της ικανότητας των μιτοχονδρίων να τροφοδοτούν εγκεφαλικούς νευρώνες, γεγονός που προκαλεί το θάνατό τους.
Η μείωση της συγκέντρωσης mtDNA προηγείται της εμφάνισης γνωστών βιοχημικών δεικτών Alzheimer (β-αμυλοειδές 1-42, πρωτεΐνες Τ-ταυ και ρ-ταυ), υποδηλώνοντας ότι η παθοφυσιολογική διαδικασία της νόσου του Alzheimer Αρχίζει νωρίτερα από ό, τι πιστεύεται προηγουμένως και ότι η εξάντληση του στο mtDNA μπορεί να είναι ένας από τους πρώτους προγνωστικούς παράγοντες της νόσου.
Επιπροσθέτως, επιτρέποντας τη διερεύνηση της πιθανής αιτιώδους σχέσης του mtDNA και της εξέλιξης της νόσου του Alzheimer, η χρήση του mtDNA ως δείκτη της προκλινικής νόσου του Alzheimer παρέχει ένα σημαντικό πλεονέκτημα έναντι των προηγούμενων βιοχημικών δεικτών: η ανίχνευση αυτού του νέου βιοδείκτη νουκλεϊκού οξέος Χωρίς τις τεχνικές δυσκολίες που σχετίζονται με την ανίχνευση πρωτεϊνών. Το MtDNA μπορεί εύκολα να ποσοτικοποιηθεί ποσοτικά ή σε πραγματικό χρόνο PCR (qPCR) ή 'Doplet Digital PCR' (ddPCR).
Πριν από αυτή τη μελέτη, οι ερευνητές δεν είχαν αναφέρει ότι τα ελεύθερα κύτταρα που κυκλοφορούν στο mtDNA μπορούν να ανιχνευθούν στο ανθρώπινο CSF. Ωστόσο, με αυτή τη μελέτη, η ομάδα του Dr. Trullas κατάφερε να ανιχνεύσει και να αναπαράγει ποσοτικά το mtDNA χρησιμοποιώντας qPCR, προσεκτικά βελτιστοποιημένο ακολουθώντας τις οδηγίες του MIQE.
Απόλυτη ποσοτικοποίηση των μορίων στόχων
Για να επικυρώσουν τα αποτελέσματά τους με το qPCR, οι επιστήμονες χρησιμοποίησαν το σύστημα QX100 Droplet Digital PCR από την Bio-Rad Laboratories. Σε αντίθεση με τις δοκιμασίες qPCR, το σύστημα QX100 παρέχει απόλυτη ποσοτικοποίηση μορίων στόχου ϋΝΑ χωρίς την ανάγκη πρότυπης καμπύλης. Ένας σημαντικός παράγοντας για την ανάλυση του CSF ήταν ότι το σύστημα «Doplet Digital PCR» δεν απαιτεί καθαρισμό του δείγματος για την απομάκρυνση των αναστολέων PCR, όπως είναι απαραίτητο για τις δοκιμασίες qPCR.
Το "Doplet Digital PCR" μας επέτρεψε να επικυρώσουμε τις αρχικές μετρήσεις του qPCR, καθώς παρέχει απόλυτη ποσοτικοποίηση στο επίπεδο ενός μορίου χωρίς να βασίζεται σε μια τυποποιημένη καμπύλη ", εξηγεί ο Trullas. «Καθώς η τεχνολογία υιοθετείται ευρύτερα, αναμένουμε ότι το ddPCR θα είναι το μέλλον της ανίχνευσης μιτοχονδριακού DNA στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό», προσθέτει.
Ο Δρ Τρούλας ελπίζει ότι άλλα εργαστήρια και νοσοκομεία θα επαναλάβουν με επιτυχία τα αποτελέσματα της έρευνας της ομάδας του, γεγονός που θα επιβεβαιώσει ότι τα μειωμένα επίπεδα του mtDNA πρέπει να διερευνηθούν ως πιθανή αιτία της νόσου του Alzheimer. Βρίσκοντας έναν τρόπο να εμποδίσουμε αυτόν τον εκφυλισμό, οι γιατροί μπορεί να είναι σε θέση να διαγνώσουν και να θεραπεύσουν τη νόσο του Αλτσχάιμερ πριν από την εμφάνιση των συμπτωμάτων.
Πηγή: www.DiarioSalud.net
